蛋白质单点质谱分析分子量测定

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品牌: 上海容昌认证
型号: 蛋白质鉴定
规格: 上海
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最后更新: 2011-05-19 08:43
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上海容大检测认证

宋诗文/Pines.song
Tel:021-60513139   15026801141
检测服务:
1)二维电影2DE电泳: 双向凝胶电泳是将不同种类的蛋白质按照等电点和分子量差异进行高分辨率分离的分析方法。成功的二维电泳可以将2000到3000种蛋白质进行分离,是目前唯一的同时能分离成百上千种蛋白质的工具。通过对蛋白质双向电泳的图谱扫描,用相关软件(PDQUEST等)进行图谱差异分析,找到差别点。然后把差别点切出,进行脱色、酶解。最后样品进入质谱测试,得到质谱原始数据文件。通过搜库可得到差别点蛋白质的详细信息。
仪器: Biorad, pharmacia 电泳仪
2)蛋白质鉴定
a)蛋白质单点质谱鉴定:考染/银染
仪器: ABI 5800 MALDI TOF/TOF
b)大规模混合蛋白质鉴定:针对液体或SDS-PAGE条带的复杂混合物用酶(Trypsin)酶解成肽段混合物,这些肽段混合物再通过液相色谱分离(如2DLC(阳离子柱SCX和C18反相柱串联)或1DLC 的C18反相柱),再用串联质谱测试,然后在相应的数据库检索进行鉴定,可同时鉴定成百上千种蛋白质。
仪器:LTQ orbitrap, Thermo; Waters Nano Aquity UPLC
3)蛋白质后修饰分析
很多mRNA表达产生的蛋白质要经历翻译后修饰如磷酸化、糖基化、乙酰化等。翻译后修饰是蛋白质调节功能的重要方式,而在生命现象的许多关键调节机制中,蛋白质的翻译后修饰与信号传导,细胞凋亡,细胞周期,生长发育以及癌症机理等诸多生物学问题有密切关系。因此,对于蛋白质后修饰的研究对阐明蛋白质的功能具有重要意义。
仪器: LTQ orbitrap, Thermo; Waters Nano Aquity UPLC
4)蛋白质分子量测定
a) 蛋白质:样品蛋白质分子离子化后,通过质量分析器对离子质荷比(M/Z)进行分析,或进一步通过演算法(如高斯算法)得到蛋白质的精确分子量。
b)化合物:利用质谱或HPLC对化合物样品分子量作分析。
5)蛋白质,化合物纯度测定
HPLC,样品通过HPLC,根据HPLC峰测定样品纯度。
仪器:Agilent 1200
6) 蛋白质全序列测定
蛋白质全序列分析是分析各个肽段而拼凑出原来的蛋白质序列。由于在液相色谱—质谱的分析中很难得到百分之百的回收率,有些分子量较小的氨基酸很容易流失而无法得到其序列,因此目前的方法是使用不同的酶对标定蛋白质酶解,再透过二级质谱的方法来鉴定肽段的序列。科致的蛋白质组学专家经验丰富,对已知或未知的蛋白质序列,均有能力为客户完成所需分析。
仪器:LTQ orbitrap, Thermo; Waters Nano Aquity UPLC,MALDI 5800 TOF/TOF.
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